初階水電工

開機程序

1. 開啟電腦，等待電腦完全啟動完成。

注：win7系統需要等待電腦的網路連接圖示上的轉動圓圈消失，顯示“”為止。

2. 按需求配置Needle wash（綠色細管的流路）、石英棒清洗液（標有Seal Wash In的流路），以及實驗所需移動相，並且確保所有流路的溶劑濾頭均在溶劑液面以下。

2.1 Needle wash配置要求：對實驗樣品有較好溶解性的溶劑。如果是水溶性樣品，建議配置成10%的甲醇（或或乙腈）水溶液。

2.2 石英棒清清洗液配置要求：對移動相中可能的析出物(如:結晶)有較好溶解性的溶劑。如果是含鹽流動相，建議使用10%的甲醇（或或乙腈）水溶液。

2.3 流動相需潔淨無氣泡。

有機相：HPLC等級進口有機溶劑如Merck、Fisher等，超音波震盪後可直接使用。

水相：由正常工作的超純水機制得的超純水（電阻>18.2 MΩ），相使用前需超音波震盪5min，並使用玻璃溶劑瓶盛裝。

3. 開啟2695主機電源，各檢測器電源。如果配有可降溫的Column oven，需接著開啟柱溫箱電源。

4. 等待儀器各元件開機自檢。

5. 自檢完成後，儀器處於Idle狀態，此時開始進行系統準備。

5.1 Wet Prime：Direct Function → Wet Prime。7.5mL/min，每管溶劑2min

目的：排除流動相中的氣泡。

特別注意：含鹽的流動相進行wet prime時，需先將該流路wet prime為水相，再將其wet prime為所需流動相，以避免流動相中的鹽析出，造成堵塞。

5.2 Purge injector：Direct Function → Purge injector。Sample loop volumes：6

目的：排除進樣器中的氣泡。

Purge injector之前，在面板上將流動相的比例修改成實驗條件的初始條件；若初始條件使用含鹽流路，應將含鹽流路用純水流路替換，比例不變。在儀器自動清洗時，需觀察樣品注射器內是否有氣泡，如果有，需重複此動作多次，直到氣泡排出為止。

5.3 Prime needle wash：Diag → Prime NdlWash

目的：清洗針外壁，防止殘留。

重複操作1-2次，直至黃色廢液管有連續的液體留出。

5.4 Prime seal wash：Diag → Prime seal wash

目的：清洗泵頭，保護柱塞杆以及柱塞杆密封圈。

5min後，可手動停止Prime seal wash，具體操作：先按Half，再按Close。

6. 開機完成。登錄軟體，進行實驗操作。

關機程序

1. 實驗結束，首先用等比例的水相代替含鹽的水相沖洗管柱一段時間（如原來使用的B路是0.5%的磷酸水溶液，請先將B的濾頭拔出，放置于純水中，灌注B，之後再沖洗）

2. 然後按照管柱的使用條件要求，使用水和當前有機相沖洗一個大的梯度，梯度時間30min。（如某C18柱，耐受水相最高比例95%。實驗流動相為甲醇和0.5%的磷酸水溶液；完成第一步後，此處使用0min： H2O：MeOH=95：5。30min： 100%MeOH

沖洗管柱。之後將管柱保存在合適的保存溶劑中，一般是ACN，請與生產商確認。

3. 取下管柱，接二通使用原來放於純水中的管路沖洗系統30min。

4. 然後將ABCD的濾頭均放置於甲醇中，灌注原來不在甲醇中的管路，然後使用1mL流速沖洗系統10min。

5. 退出並關閉軟體，然後停流速，關閉儀器電源。

*水相必須1天一換，洗針液和Seal wash溶液必须定期更换