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先將Sample Manager的盤子移走,開啟Console,點選Sample Manager 的Maintain中Replace選項裡的Needle

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Waters Alliance 2695系統出現進樣面積再現性不佳%RSD>2)的問題時(請先確認保留時間的再現性沒有問題),可以做以下診斷以確定故障原因。峰面積再現性差的診斷可從儀器硬體故障原因色譜方法原因兩個方面考慮

儀器使用及硬體原因

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開機程序

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UPLC H-Class,實驗過程中,可能會遇到系統壓力曲線異常,壓力曲線不能重合,流速不穩定,壓力波動大、偏高或偏低等問題。壓力偏高的故障排除在之前的文章中已介紹過,本次將介紹H-Class系統壓力波動大故障排除,我們可以利用H-Class內建了滲漏測試(Leak test),方便我們檢查壓力的密閉性。因此遇到此類問題可按照方式來檢查。

首先Prime QSM

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液相系統壓力是衡量儀器系統是否正常的重要指標之一,實驗過程中可能會遇到壓力升高的情況,為了儘量減少此類問題,建議日常實驗時注意流動相、溫度、儀器維護保養等方面的問題。

實驗過程中造成壓力升高的原因可能有:溫度太低、流速太高、移動相黏度大、流路系統堵塞、儀器硬體故障等。液相系統壓力高可以按以下流程來檢查,今天主要介紹UPLC系列的H-Class系統壓力高的檢查方法。

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隨著HPLC的普及,分析方法學的開發成為一個合格的分析研究員的標配,而Column的篩選是分析方法開發的第一步,也是最重要的一步,優秀的分析研究員可以根據化合物的結構特徵很快確立所需的Column。然而,Column的使用或保養不當時,常造成分析者的困擾,所以如何正確使用Column,也是分析源重要課題之一,以下是Column活化以及保存的建議

 

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停機待機

若您的儀器在長假期間關機停用,為了避免由於冬季低溫而可能引發的電源、保險絲燒毀或CPU2000報警,我們建議您在長假結束後按照以下步驟開啟儀器:

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停機待機

1. 在停機前,根據您最後一次的實驗條件,把管柱和儀器清洗乾淨。例如反相系統管柱柱最後應保存在有機溶劑中(MeOH/ACN),為保證管柱不被損壞,取下的管柱兩頭需用堵頭封死;儀器也同樣保存在有機溶劑中(最好是甲醇溶劑);同時注意儀器上的所有管線都要清洗乾淨,再把管線(如:2695A/B/C/DUPLCA1/A2/B1/B2等)保存在有機溶劑中,以保證放假後儀器可正常工作。

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實驗室儀器使用過程中,大家難免會遇到一些儀器故障及報錯資訊,貼心的Waters工程師們Waters Alliance 2695為例,為大家羅列了一些常見的儀器故障及解決方法供各位參考。

為方便大家手機端閱讀,通篇以異常運行狀態下儀器螢幕顯示的資訊為引導,若需查看幫助說明全文,在對應的灰框進行下滑操作即可。

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揮發性光散射偵測器(ELSD)

科學工作者通常將ELS檢測器用於UV/Vis回應很低或沒有UV/Vis回應,並且由於電離效果不佳而無法通過質譜技術進行分析的樣品。ELS檢測具有一定的局限性,因為這是一項破壞性的檢測技術,並且當樣品的揮發性與流動相接近時,檢測效果欠佳。此外,ELSD的線性範圍也較窄。然而ELS檢測器也是一款總體性能檢測器或“通用型”檢測器,它們的適用範圍仍然很廣。有的學者會認為ELSD是可以做Gradient 的RI Detector由於ELS檢測器能夠為色譜工作者提供獨特的分析能力,它們的價格有時與PDA檢測器不相上下。常見應用:甘油三酸酯脂類天然產物糖類油類的分析。

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折射率偵測器(RI)

RI偵測器是一款公認的通用檢測器,它也是首款專為凝膠滲透層析(GPC)而設計的偵測器。它應用的原理是:所有樣品都會改變溶劑的折射率,利用這一點,RI偵測器能夠檢測出所有化合物。通過以純淨的流動相作為參考進行對比,示差折光偵測器可以監測和測定流經檢測器的流動相的總體折射性能。由於流動相中會夾帶其它化合物,因此在與參考進行對比時,檢測器將記錄折射率的變化。簡單說,分析物通過flow cell時,會有折射出現,即可有訊號產生。RI Detector的缺點是只能運行isocratic。作為一款通用型總體性能檢測器,折射率偵測器的靈敏度有限。由於分析能力和功能有限。常見應用:糖類聚合物(Polymer)脂肪酸的分析。

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螢光偵測器(FLR)

當分析沒有UV吸收光時,並有選擇性需求或其它檢測器的靈敏度無法滿足分析要求時,我們通常會選擇FLR檢測器。

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Communication failure比較好判斷,因為大多數儀器模組在Empower軟體運行樣品介面會有控制儀器的小視窗。如果儀器本身的狀態正常,但是彈出小窗顯示通訊失敗,基本是通訊問題。

通常最簡單的處理方式為:在顯示通訊失敗模組的任意空白位置點擊右鍵,選擇重設或Reset選項,儀器即會自動嘗試恢復通訊連接。如果這個操作無法解決問題,則需要對其原因進行近一步分析,並嘗試其他解決方案。

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液相/質譜(LC/MS)儀器的檢測器有各種形狀和大小,沒有哪種檢測器能夠適用于所有應用,有時甚至需要使用多種檢測器才能對樣品進行全面的分析。

在選擇檢測器之前,我們應先瞭解下如今市面上到底有多少種不同類型及不同檢測目的的檢測器:

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大家在平時液相分析工作中,是否碰到過基線噪音干擾?莫名的基線波動、波浪狀噪音或基線漂移等問題?
此次為大家總結了液相實驗中可能出現的基線噪音問題,以及如何減小和消除噪音。

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HPLC已經成為實驗室一款常用儀器,使用儀器時最常見的故障就是遇到"漏液"和"堵塞"情況。上述兩個問題在數值上通常都表現為壓力的變化:漏液會引起系統壓力的降低,而堵塞會引起系統壓力的飆升。

液相系統壓力產生的原因在於流動相流經管路及色譜柱時會有阻力,即所謂的反壓或系統壓力。系統壓力的單位有:巴(Bar)、兆帕(Mpa)和磅/平方英吋(psi),它們之間的換算關係為1 Bar=0.1 Mpa=14.5 Psi。

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以目前全球HPLC市占率最高的Waters Alliance HPLC為例

首先,如果您遇到了Alliance HPLC壓力波動,應先確認您的儀器方法是使用單一溶劑還是兩溶劑互相混合。如果使用兩溶劑互相混合的壓力波動,建議先排除脫氣機的問題。面板上Degasser mode應該是On,且脫氣機壓力在0.9psi以內正常。若Degasser異常,需要換成單一溶劑做進一步檢查,檢查方法見下文。

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